什么是pcr及其原理 什么叫做pcr技术

2024-10-06 10:36

小华给大家谈谈什么是pcr及其原理,以及什么叫做pcr技术应用的知识点,希望对你所遇到的问题有所帮助。

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1、PCR是在中进行的DNA反应,基本原理是依据细胞内DNA半保留的机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度,以促使双链DNA变成单链,单链DNA与人工合成的引物退火,然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。

2、PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。

3、需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高温变性、低温退火、中温延伸3个步骤构成PCR反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的DNA得以迅速扩增。

4、DNA模板变性:模板双链DNA?单链DNA,94℃。

5、退火:引物+单链DNA?杂交链,引物的Tm值。

6、引物的延伸:温度至70℃左右,TaqDNA聚合酶以4种dNTP为原料,以目的DNA为模板,催化以引物3’末端为起点的5’→3’DNA链延伸反应,形成新生DNA链。

7、新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR,就是如此反复循环,使目的DNA得到高效快速扩增。

8、基本原理:在模板、引物、4种dNTP和赖热DNA聚合酶存在的条件下,特异扩增位于两段已知序列之间的DNA区段的酶促合成反应。

9、基本步骤:变性:加热使双链DNA变为单链; 退火:降温使引物和互补模板在局部形成杂交链 ;延伸:耐热DNA聚合酶按5’→3’方向催化以引物为起始点的延伸反应。

10、生物一一四。

11、PCR的一般过程是什么。

本文到这结束,希望上面文章对大家有所帮助。

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